western 做GAPDH的内参，总有杂带

Alsaith 2015-08-31 19:38:39 阅读: 2964

已经做了一个多月的 GAPDH 内参，总是有杂带，我用的是 bioworlde 品牌的一抗，说明书上建议的浓度是 1:5000—1:15000。我第一次做的时候是用 1:5000，结果是有明显的杂带，而且杂带和我要的条带矮得很近；第二次做是 1:7000，杂带明显且与所要条带距离很近；第三次，重新配置一抗，换了一组样，其他条件和前两次一样，条带表带效果不好，但是杂带没有了；从第四次开始，次次出现杂带，而且第四次我的样品和方法与第三次相同。我试了很多方法，比如说增加浓缩胶、加大封闭时间、用封闭液配置一抗，单仍然有杂带......求助各位大神，怎样才能解决，我今年研一刚结束，刚做了一年western，望帮助QAQ

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