维生素C含量的测定实验
利用染料2,6-二氯酚靛酚作氧化剂，可将还原态的维生素C氧化成脱氢维生素C，而染料本身被还原成无色的衍生物。2,6-二氯酚淀粉在酸性条件下呈红色。在滴定终点之前，滴下的2，6-二氯酚淀粉立即被还原成无色。当溶液从无色转变成为红色时，即为滴定终点。
一、试剂
1. 实验材料：水果或蔬菜。
2. 仪器：（1）微量滴定管；500毫升×1；（2）量瓶：50毫升×2；（3）三角瓶；500毫升×2；（4）研钵；（5）量筒； （6）刻度吸管；10毫升×2；
3. 试剂：
（1）1%草酸：秤取5.0克草酸溶于少量蒸馏水中，定容至500毫升。
（2）2%草酸：秤取10.0克草酸溶于少量蒸馏水中，定容至500毫升。
（3）0.001N2，6-二氯酚靛酚钠溶液：称取干燥的2，6-二氯酚靛酚钠60毫克，放入200毫升量瓶中，加热蒸馏水中100-150毫升，滴加0.01N NaOH4-5滴，强烈摇动10分钟冷却后加水至刻度。摇匀后用紧密滤纸滤于棕色瓶中，贮于冰箱中备用，有效期一周。使用前需标定（见附注）。
实验过程
1. 样品的处理和提取：
称取4.0克新鲜样品，至研钵中，加5毫升2%草酸，研成匀浆。通过漏斗将样品提取液转移到50毫升量瓶中。残渣再用2%草酸提取2-3次，提取液及残渣一并转入量瓶。2%草酸总量为35毫升，最后以水定容。溶液定容时若泡沫较多，可加几滴乙醇消除泡沫后再定容。摇匀，过滤，滤液备用。
2. 样品的测定：
吸取滤液10毫升，放入50毫升三角瓶中，立即用2,6-二氯酚靛酚钠溶液滴定至出现明显的红色，并在15秒内不消失为止。记录所用滴定液体积。
3. 空白测定：
在另一50毫升三角瓶内，放入35毫升2%草酸，并用1%草酸定溶，摇匀，取此液10毫升放入另一50毫升三角瓶内，用2,6-二氯酚靛酚钠滴定至终点，记录染料用量。
X：100克样品所含维生素C毫克数（毫克/100克）
W：称取样品重（克）
V1：滴定样品所用染料毫升数
V2：滴定空白所用染料毫升数
V：样品提取液稀释之总体积（即50毫升）
K：1毫升染料液所能氧化维生素C之毫克数，可由标定算出
注意事项
mso-bidi-language:AR-SA">二氯酚靛酚钠溶液的标定：准确称取维生素
C20毫克，用
1%草酸溶解定容至
200毫升。吸取此液
10毫升，以
1%草酸再次稀释定容至
200毫升。吸取此液
10毫升，放入
50毫升三角瓶中（同时吸取
10毫升
1%草酸于另一个
50毫升三角瓶中，做空白对照立即用所要标定的
2，
6-二氯酚靛酚钠滴定至粉红色出现
15秒不
消失，记录所用毫升数，按下式计算K值（即1毫升染料所能氧化抗坏血酸的毫克数）。
(式中：G为称取维生素C的毫克数。V为滴定10毫升标准维生素C时所用去染料的毫升数，与滴定空白所用毫升数之差值)
2. 操作要尽可能快，并防止与铁铜器具接触，以减少维生素C的氧化。
3. 草酸及样品的提取液避免日光直射。
4. 当样液本身带色时，测定前于提取液中加2-3毫升二氯乙烷。在滴定过程中当二氯乙烷由无色变粉红色时，即达终点。
