脂肪浸提——索氏脂肪浸提法实验
用脂肪溶剂将脂肪从样品中浸提出来,然后将溶剂蒸发除去,称取瓶中残留物的重量或称量样品损失的重量,即可求出样品中粗脂肪的含量。 在测定样品含油量时,通常采用沸点低于60℃的有机溶剂作为脂肪溶剂 (如乙醚和沸点为30℃至60℃的石油醚)所提取的脂溶性物质为脂类物质的混合物,其中含有脂肪、游离脂肪酸、磷脂、酯、固醇、芳香油、某些色素及有机酸等,因此称为粗脂肪。
一、实验材料、仪器和试剂:
1、实验材料:(1)待测植物样品;(2)滤纸筒。
2、仪 器:(1)兰氏脂肪浸提仪;(2)电热恒温水浴;(3)分析天平。
3、试 剂:(1)乙醚。
二、操作步骤:
1、仪器的安装:
将索氏脂肪浸提取仪的冷凝管及脂肪接受瓶的磨砂玻璃接口处用铅笔编号,洗净烘干。脂肪接受瓶放入干燥器内冷却后称取空瓶质量,仍放回干燥器内备用。将冷凝器用铁驾台卡夹安装在加热用的电热恒温水浴上,装牢。在冷凝器的进出水口分别装上橡胶管,通向冷凝器内蛇型管的短管为进水口,通向外层的短管为出水口。
2、样品的称取:
取滤纸筒(25ф70毫米)截成35毫米的长度,用铅笔编号,两边对称的夹上一个回形针,留出一段铁环作挂钩用。在分析天平上称取空滤纸筒的重量,加入经1 毫米筛孔制备的样品2 -3克,称准其重量,再向滤纸筒塞入脱脂棉一小块,防止样品散失,将已加入样品的滤纸筒放在一个小烧杯内,然后放入90℃的真空干燥烘箱内烘5-6 小时,取出放入干燥器内冷却备用。
3、脂肪的浸提:
将滤纸筒挂在冷凝器内固定在杆下端的钩子上,再将脂肪瓶加入无水乙醚70毫升,套在冷凝器下面的磨口上。把装好冷凝器的脂肪瓶放在预先调好温度(50-60℃)的电热水浴上。松开固定杆上的止水夹,将滤纸筒浸入乙醚内,开放冷凝水阀门,注意乙醚煮沸的情况,要求回流速度适当,不可太快,以免冷凝不及乙醚在冷凝器上部逸失。滤纸筒内样品经热沸的乙醚浸提20分钟后,提起滤纸筒操作杆至最高位置,冷凝后的乙醚自溢流管流入,装满滤纸筒,使之淋洗滤纸筒上部的筒壁,然后从乙醚逐步回收管回收乙醚,直至脂肪接受瓶中的乙醚完全蒸发干为止。关闭电源,关上冷凝水的阀门。
4、脂肪瓶的干燥和滤纸筒乙醚的回收:
脱下脂肪瓶,用绸布擦去手摸的痕迹及沾上的尘土,放入90℃的直空干燥箱内烘45-60分钟后取出放入干燥器内,冷却半个小时后称重。滤纸筒脱离挂钩后立即放入一个空的脂肪瓶内,一个脂肪瓶可以同时放入4-8个,套上冷却器,开放冷却水,打开水浴电源回收乙醚。
注意事项