根系活力的测定实验
根据植物矿质吸收的理论,认为植物对溶质的最初吸收具有吸附的特性,并假定这时在根系表面均匀地复盖了一层吸附物质的单分子层。因此能根据根系的某种物质的吸附量来测定根的吸收面积。常用甲烯蓝作为被吸附物质,它的被吸附量可以根据溶液浓度的变化用比色法准确地测出。已知1毫克甲烯蓝成单分子层时占用1.1平方米的面积。据此即可求出根系的总吸收面积。当根系在甲烯蓝溶液中已达到吸附饱和而仍留在溶液中时,根系的活跃部分能把原来的物质吸收到细胞中去,因而继续吸附甲烯蓝。而后根据吸附量求出活跃吸收面积,可作为根系活力指标。
一、材料与设备
1. 植物材料:最好用水培植物的根,如用砂培植物的根,在冲洗石英砂时应十分小心,以免将根系折断或伤害。
2. 仪器与用具:
(1)581G型光电比色计或721分光光度计1台;(2)小磁杯或小烧杯三只;(3)50或100毫升量筒一个(依根系大小确定);(4)刻度吸管,1ml1支,10ml 1支;(5)试管(15×150毫升)10支;(6)量瓶,100ml 1个,1000ml 1个;(7)吸水纸适量;(8)试管架1个。
3. 试剂:
(1)0.0002N甲烯蓝溶液。
精确称取64mg甲烯蓝在烧杯中加水溶解,转入1000ml量瓶中,加水定容,摇匀即成。此溶液每ml含有甲烯蓝0.064mg。
(2)每毫升含0.010毫克的甲烯蓝溶液。
用刻度吸管吸取0.0002N甲烯蓝15.6毫升放入100毫升量瓶中,加水至刻度,摇均即成。
二、 操作步骤
(1)甲烯蓝溶液标准曲线的制作:
取试管7支,用玻璃铅笔编号,按下表次序加入各溶液,即成甲烯蓝系列标准液:
以第一管(水)为对照在光度计下比色,读出光密度(波长660毫微米),以甲烯蓝浓度为横坐标,光密度为纵坐标绘成标准曲线。
(2)取根系(待测植物根系)用排水法在量杯或量筒中测定其根系体积。
(3)把0.0002N甲烯蓝溶液(每毫升溶液中含有0.064毫克甲烯蓝)分别倒在三个编号磁杯里(或烧杯里)磁杯中溶液量约10倍于根的体积,准备记下每杯的溶液用量。
(4)取根系,用吸水纸小心吸干数次,慎勿伤根,然后顺序地浸入盛有甲烯蓝溶液的磁杯中,在每杯中浸1.5分钟。注意每次取出时都要使甲烯蓝溶液从根上流回原磁杯中。
(5)从三个磁杯中各取1ml溶液加入试管,分别稀释至10倍,用电光比色计测得其光密度,查标准曲线,求出每杯浸入根系后溶液中剩下的甲烯蓝毫克数。
测定根系吸收面积记载表
(6)把结果记录下来,并依据下式求出根的吸收面积:
C--溶液原来浓度(mg/ml) C'--浸根后的浓度(mg/ml)
V--溶液量(ml) 1,2,3为编号(磁杯)