植物抗逆性的鉴定实验

当植物组织受干旱或其它不良条件如高温、低温等影响时,常能伤害原生质体的结构而引起透性增大,结果细胞内含物将有不同程度的外渗,使外渗液的电导度增大,用电导仪即可明显地测定出来,透性变化愈大,表示受伤愈重、抗性愈弱。
一、材料与设备

1. 植物材料:小麦、玉米或其它作物叶片。

2. 仪器与用具:(1)电导仪(DDS-11型或DDS-11A型)1台;(2)分析天平(感量万分之一)1台;(3)温箱1个;(4)真空泵1台;(5)真空干燥器1个;(6)恒温水浴锅1个;(7)烧杯、50毫升10只;(8)量瓶:100毫升6个,1000毫升1个;(9)玻璃蒸馏器或离子交换纯水器1套;(10)玻棒10根;(11)滤纸若干;(12)洗瓶1个;(13)解剖剪1把。

3. 试剂:

(1)重蒸馏水或无离子水;

(2)100ppm氯化钠标准液:取分析纯氯化钠100毫克,先溶于少量无离子水或重蒸馏水中,用1000毫升量瓶定容并摇匀;

(3)硫酸-重铬酸钾洗涤液适量。

二、操作步骤

1. 清洗用具,由于电导变化极为灵敏,稍有杂质即产生很大误差,故清洗为重要步骤,所以玻璃用具均需先用肥皂洗,再用新配洗涤液洗,然后用自来水、无离子水(或重蒸馏水)各洗四五遍(最后容器向下用水冲),然后倒置于洗净而垫有洁净滤纸的盘中,上用洁净纱布或玻璃板覆盖,需要干的可入烘箱烘干。

2.作标准曲线:如需要定量测定透性变化,可用分析纯NaCl配成0,10,20,40,60,80,100ppm的标准液,在20~25℃恒温下用电导度测定,读出电导数,并作成标准曲线,如只需定性,则作标准曲线这一步可以省去。

3.准备试验材料:

选用小麦或其它植物一定部位生长及叶龄相似的叶子若干,剪下后先用纱布洗拭净,取2份,各重2克,一份在40℃温箱内萎蔫半至1小时,一部分插入水杯中做对照。处理后分别用蒸馏水冲洗两次,并用洁净滤纸吸干,然后剪成长约1厘米的小段,放入硬质小玻璃杯中(大小能容电极为度),并用玻棒压住,在烧杯中准确加入10-15毫升无离子水浸没叶片。然后放入真空干燥器,用抽气机抽气7-8分钟,以抽出细胞间隙中的空气。然后缓缓放入空气,水即被渗入组织中而使叶片变成半透明状。注意在整个过程中,叶片及与叶片接触的用具必须绝对洁净,也不应用手直接接触叶片,以免污染。此外还应防止口中呼出的CO2溶于杯中。

4.把盛有叶片的水杯放入恒温水浴中:维持水温20-25℃,1小时后,用洁净玻璃棒轻轻搅拌,然后轻轻夹出叶片,仍在原温度下用电导仪测定,记录读数。与标准曲线对比,即可求出溶液渗出的电解质相当于NaCl的ppm数。另用不加叶片而同样处理的水杯作空白测定。由正式测定减去空白测定的数值,即为叶子外渗量。如只作定性测定,则用二处理直接比较即可。比较经萎蔫处理及对照的测定结果,可知干旱高温的影响。测定致少要有三个重复。
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