植物光合强度测定实验
根据叶中脉两侧结构及生理功能的相似性,可以先剪下半叶置于暗中,剩下的半叶待进行一定时间的光合作用后,有干物质积累,在隔断光合产物往外运输的情况下(即杀死韧皮部又不损伤木质部使水分等供应正常进行),再测定半叶的干重,二者之差为被测叶片在该时间内光合作用产物的积累量。
设上午取的暗中的叶片重a毫克,经历光合作用后为b毫克,取样面积为A cm 2,照光时间为t,则总光合速率为
1.选材:在田间选取生长状况较一致的棉花植株,在每株上选取部位对称性良好,厚薄均匀的无病虫害的功能叶片,依次编号挂牌。
2.处理:在选定的叶片基部进行处理,以破坏韧皮部而保留木质部,使叶片依靠木质部得到足够的水分,同时光合产物又运不出去。
(1)环剥法:用刀片将叶柄的外皮环剥半厘米左右(适于韧皮部较厚且易剥离的植物)。
(2)抑制法:用棉球浸上5%三氯乙酸在叶柄基部涂一圈。
(3)烫伤法:用棉花球在90℃以上的开水中浸一浸,然后在叶柄基部烫一分钟,如果有明显的水浸状表示烫伤完全。对于韧皮部较薄,木质部不坚硬的植物用烫伤法好。但烫伤程度不易掌握,因此以蛋白沉淀剂三氯乙酸处理为宜。为了不改变叶片角度还可以用锡纸或塑料管包围之。
3.剪取样品:叶片基部处理完毕后,即可剪取样品,记录时间,按顺序依次剪下半叶(主脉不剪下),按编号顺序夹于湿润的纱布中,贮于暗处。过四、五小时后,再依次剪下另半叶,同样按编号夹于湿润纱布中,两次剪叶的顺序一致,使各叶片经历相等的照光时数。
4.称重比较:将各同位叶片的两半对应部位迭在一起,在无粗叶脉处放入已知面积的模板,用刀片沿边切下两个叶块,分别置于照光及暗中的两个称量瓶中,或用打孔器(已知直径),在叶片上钻取20-40片园片(尽量少带叶脉),分别于照光和暗中的两个称量盒中,在105℃下烘10分钟以杀死细胞,然后降到70-80℃烘3-4小时,至恒重为止。拿出铝盒在干燥器中冷却后,方可称重。(准确到1mg)。