尿糖检查实验
在试剂带上没有葡萄糖氧化酶(GOD)过氧化物酶(POD)色素原及弱酸性缓冲液所组成的反应试剂以及作为基底颜色的蓝或黄色色素,把这种试带浸入尿中,如尿内含葡萄糖,因葡萄糖氧化酶(GOD)作用,葡萄糖被氧化为葡萄糖醛酸和过氧化氢(H2O2)H2O2在过氧化物酶(POD)的作用下放出新生态氧把色素原氧化而显色,指示反应如下: 葡萄糖 +O2(来自空气==葡萄糖酸十2H2O, 色素原(无色)十H2O2→氧化型色素(显色)+2H2O所用的色素原常用者为被氧化成蓝色的邻甲苯胺,而有的则用碳化钾,后者被氧化成褐色的游离碘. 实验操作:将试带浸入尿中,5秒后取出,在自然光线下与标准色板比较。判定结束,若颜色不变为阴性,若色素为邻用苯胺,显蓝色为阳性。若色素为碘 化钾显褐色为阳性.
葡萄糖氧化酶法:原理同葡萄糖氧化酶试带法.
实验操作:测定时先将酶酚混合,试剂在37℃水浴箱中预热10分钟.并将尿液标本稀释10倍,再按表操作
葡萄糖氧化酶比色法操作步骤
测之管 标准管 空白管
稀释后尿液 20微升 - -
葡萄糖标准液 - 20微升 -
酶酚混合试剂 4ml 4ml 4ml
混合后在37℃水浴箱中保温5分钟,用空白管调零,在500nm波长处比色.
计算:葡萄糖(20mol/L)=(测定管吸光度/标准管吸光度)×5.55
实验报告:晨尿(或随机尿)标本:葡萄法×2umol/L
注意事项
一、 葡萄糖氧化酶试带法
1、此法的灵敏度250mg/L,而对葡萄糖有高度的特异性,对其他糖类均不起反应.
2、注意试带的酶促反应时间,按规定时间与标准板比色试剂保存时不能将其暴露于空气中和阳光下,也不得与煤气接触,应保存于阴凉干燥处,有效期多为半年.
3、若服用大量维生素C和应用汞类利尿剂等药物,可呈似阴性反应.为了消除维生素C的抑制反应、患者试验前,至少须停用维生素C在24h以上,一般停用维生素C 3天.
二、尿糖定量检查
1、正确执行尿标本的稀释和吸取技术,所用容器必须经过校正.
2、其他注意事项与葡萄糖氧化酶试带法相同.