2.1.6 CsCl法从组织中提取RNA
液氮 组 织 胍 溶 液 ： 590. 8 g 异 硫 氰 酸 胍 溶 于 400ul DEPC 处 理 的 水 中 ，加 人 25mmol/L Tris-Cl(pH7 .5 ). 20 ml 0. 5mol/L EDTA( pH8. 0 ) ，搅拌 过 夜 ，加水至 950ml，过滤 , 最 后 加 50 ml，β-巯基乙醇。 20%(m/V ) 十二烷基肌氨酸钠 5.7m ol/L CsCl 组 织 重 悬 液 :5 mmo/Ll EDTA， 0.5%(V/V) 十二烷基肌氨酸钠， 5%β-巯基乙醇 3mol/L乙酸钠 pH5. 2 酚 ：氯 仿 ：异戊醇 ( 25 : 24 : 1 )，氯 仿 ：异戊醇 (24 :1) 组织捣碎机 离心机 无水乙醇.
1 ) 从动物体快速取出组织，切 成 小 于 2 g 的 小 组 织 块. 在液氮中速冻，每 2 g 小组织块 加 人 20m l 组织胍溶液(不含十二烷基肌氨酸钠）后立即在组织捣碎机中研磨 2〜 3 次 ，每 次 1 0s . 速冻是关键，因为将组织放在胍溶液中等候捣碎时，R N A会发生 降解
2 ) 于 12℃ 12 OOOg 离 心 10mim。上 清 加 人 0 .1 倍 体 积 的 20% 十二 烷 基 肌 氨 酸 钠，65℃加热 2 min
3 ) 每毫升液体加人 O . lg CsCl，并使之溶解。将样品加于已高压及硅化处理离心管中 的 9 ml 5 . 7mol/L CsCl垫层之上。于 22℃113 000 g 离心过夜。
4 ) 小 心 移 去上清 . 倒 转 离 心 管 以 使 剩 余 液 体 流 干 。切下离 心 管 的 底 部（ 含 R N A 沉淀 ）将其 放 在 一 个 50 ml 塑料管中，加 人 3 ml 组织重悬液在 4℃ 溶解沉淀，可过夜或更久。
5 ) 依 次 以 酚 ：氯 仿 ：异戊醇 （25 :24 ：1）和 氯 仿 ：异戊醇 (24 : 1) 抽提溶液。
6） 加入 0.1 倍 体 积 的 3moI/L PH 5.2 的乙酸钠缓冲液和 2.5 倍体积的无水乙醇，沉淀 ，重 溶 RNA 于水，定量和储存。
