亚硫酸氢盐修饰后测序法检测甲基化
1.将约2ugDNA于1.5mlEP管中使用DDW稀释至50ul；
2.加5.5ul新鲜配制的3M NaOH；
3. 42℃水浴30min；
水浴期间配制：
4.10mM对苯二酚（氢醌），加30ul至上述水浴后混合液中；（溶液变成淡黄色）
5. 3.6M亚硫酸氢钠（Sigma，S9000），配制方法：1.88g亚硫酸氢钠使用DDW稀释，并以3M NaOH滴定溶液至PH 5.0，最终体积为5ml。这么大浓度的亚硫酸氢钠很难溶，但加入NaOH后会慢慢溶解，需要有耐心。PH一定要准确为5.0。加520ul至上述水浴后溶液中。
6.EP管外裹以铝箔纸，避光，轻柔颠倒混匀溶液。
7.加200 ul 石蜡油，防止水分蒸发，限制氧化。
8.50℃避光水浴16h。
