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λ噬菌体的载体表达实验-基本方案2
1. 将表达载体转化一种复制缺陷型的大肠杆菌cI
+
溶源菌。转化物涂布于LB/抗生素平皿上并于37℃下温育。
2. 在LB/抗生素培养基中,37℃过夜培养转化细胞。
3. 以≥1:20的比例将过夜培养物稀释于新鲜的LB/抗生素培养基中。37℃,250~300 r/min 速度振荡培养至OD
650
=0.4。
4. 加1/1 000体积加入60
mg/ml 萘啶酮酸至终浓度为60 μg/ml,37℃继续培养5~6 h。
5. 收获细菌并分析基因产物。
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