蛋白质含量的测定实验-考马斯亮蓝法

考马斯亮蓝G250 在酸性溶液时呈茶棕色, 最大吸收峰在465 nm。当与蛋白质结合后变成深蓝色, 最大吸收峰转至595 nm, 在1～100 μg/ ml 蛋白质浓度范围内成正比。

1. 样品的制备
用台秤称取小白菜或其他植物10 g , 用剪刀剪碎后, 用碾钵碾成匀浆, 加水30 ml , 继续碾10 min , 倒入离心管中, 另加5 ml 水将剩余物洗进离心管, 平衡后于1000 r/ min 离心15 min , 取上清10 ml 定容到100 ml , 待测。

2. 标准曲线的制作与样品测定

按下表操作， A . FOLIN 酚法 B . 考马斯亮蓝法

(标: 标准蛋白质溶液, F : FOLIN 试剂: K: 考马斯亮蓝 G250 试剂。自己制备的蛋白质溶液测定含量时注意稀释度)

注意事项

1. 蛋白质样品和呈色剂都不应有沉淀, 有沉淀应过滤除去。

2. 染料与蛋白质结合后, 形成的蓝色复合物易轻度沾附试管壁或比色皿, 每次使用不能用有着色的比色皿。使用完后应立即清洗干静。

Protocol

TRIzol RNA提取方法 2656
琼脂糖凝胶电泳实验 2134
种子与幼苗实验 2064
A Brief Protocol for Gene Targeting by Cas9 in Zeb 1976
茎的形态与初生结构观察实验 1948
DNA定点突变实验 1889
实时荧光定量PCR（realtime PCR） 1857
药物半数致死量LD50的测定实验 1732
聚合酶链式反应（PCR） 1671
茎的次生结构实验 1583

蛋白质含量的测定实验-考马斯亮蓝法

Protocol

623577364