细胞组分的化学反应实验-细胞内过氧化物酶的显示
过氧化物酶能把许多胺类氧化为有色化合物,用联苯胺处理标本,细胞内的过氧化物酶能把联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝,进而变为棕色产物,因而可以根据颜色反应来判定过氧化物酶的有无或多少。
一、方法
1. 取小鼠一只,以颈椎脱位法将其处死,迅速剖开其后肢暴露出股骨,将股骨一端斜向剪断,用PBS缓冲液湿润过的注射器针头吸出骨髓一滴滴到载玻片上。
2. 推片,室温晾干。
3. 将涂片放入0.5%硫酸铜中浸30秒~1分钟。
4. 取出涂片直接放入联苯胺混合液中反应6分钟。
5. 清水冲洗,放入1%番红溶液中复染2分钟。
6. 清水冲洗,室温晾干。
7. 镜检或封片后镜检。
二、结果
涂片中可见一些细胞中存在着蓝色或棕色颗粒,为过氧化物酶所在位置。