正常细胞常规核型的标本制备实验-人淋巴细胞染色体标本制备
在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素，破坏细胞纺锤体的形成，使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞，低渗处理，使细胞胀大，染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的蛋白质，使染色体清晰且分散良好。再结合离心技术去掉红细胞碎片，然后采用空气干燥法制片获得中期染色体标本。
1. 微量全血细胞培养至68小时左右，用1 ml 注射器号针头向每个5 ml 培养瓶内加2滴秋水仙素溶液。
2. 摇匀后继续培养3小时，此项操作不需要严格无菌。
3. 按时终止培养，用吸管温和吹打成细胞悬液后，移至10 ml 离心管中。
4. 用天平平衡后以1000 rpm 离心8分钟，弃大部上清，剩0.5 ml。
5. 再吹打成细胞悬液，加入预热37℃的 0.075 mol/L 的KCL溶液9 ml，置37℃水浴中低渗处理30分钟（这期间配制3：1甲醇一冰醋酸固定液）。
6. 向离心管中加入1 ml 固定液预固定。平衡后以1000 rpm 离心8分钟，同样剩 0.5 ml 上清。
7. 轻轻将细胞吹成悬液，加5~6 ml 固定液，室温下固定30分钟。然后离心，弃上清，重复固定一次。
8. 再离心，留0.1~0.2 ml 上清，吹打成细胞悬液。
9. 吸取1~2滴悬液，在距载片约15 cm 高度滴于预冷的干净载玻片上，迅速对准细胞吹气促进染色体分散。
10. 斜放载玻片，在空气中晾干（此期间配制Giemsa染液，Giemsa原液和磷酸缓冲液1：10）。
11. 将标本面朝下放在染色槽中，加入染液染10分钟，自来水冲洗，晾干后观察。
12. 低倍镜下，制片质量较好的标本上可看到有较多的分裂相，染色体之间分散良好，互不重叠。
13. 油镜下观察可见每一条染色体都含有两条染色单体，两条单体由着丝粒相结。
14. 分区计数染色体数目并判定性别，或拍照后进行核型分析。
