胰岛素测定实验

一、材料及试剂
 
1.  胰岛素标准品(不同浓度的)
 
2、125 I-胰岛素
 
3、抗血清
 
4、第二抗体
 
5、分析试剂  为0.05 mol/L pH7.4 PBS液+1%正常兔血清。
 
6、计数仪
 
7、试管、加样器、离心机等
 
二、操作方法
 
1.  按表进行。
 

2.  测定和计算反应完毕后,将各管于室温3 000 r/ min离心30 min,仔细吸取上清液,收集于放射性废液贮存容器内。用-计数仪分别测量各管沉淀物(B)的放射性强度(cpm),以两管的cpm均值表示。再以第1,2管的cpm值为Bo,分别计算结合率(B%,即B/Bo×100%),用B%为纵坐标,不同浓度胰岛素标准品为横坐标,绘制标准曲线。然后根据待检管的B%,从标准曲线中即可查得胰岛素的相应含量。
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