DNA作图实验-多种酶消化

1.  用低频率切割的不同限制性内切酶分别完全消化DNA。
 
2.  从每个反应取小份样品作电泳分析,用已知的分子量标准作对照。剩余的样品置于冰浴。
 
3.  比较分子量标准估算出DNA片段的长度,推导出每种限制性内切酶的酶切位点数目。
 
4.  从1的每个样品管中取少许置另外的管中,用第二种内切酶消化,电泳分析比较酶切结果。

(1)两种酶切割。

(2)第一种酶单独切割。

(3)第二种酶单独切割。

5.  估算DNA片段的长度,重复此步骤,直到明确一致而且相互不矛盾的限制性内切酶位点被推导出来,DNA图谱便告完成。
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