DNA作图实验-多种酶消化
1. 用低频率切割的不同限制性内切酶分别完全消化DNA。
2. 从每个反应取小份样品作电泳分析,用已知的分子量标准作对照。剩余的样品置于冰浴。
3. 比较分子量标准估算出DNA片段的长度,推导出每种限制性内切酶的酶切位点数目。
4. 从1的每个样品管中取少许置另外的管中,用第二种内切酶消化,电泳分析比较酶切结果。
(1)两种酶切割。
(2)第一种酶单独切割。
(3)第二种酶单独切割。
5. 估算DNA片段的长度,重复此步骤,直到明确一致而且相互不矛盾的限制性内切酶位点被推导出来,DNA图谱便告完成。