免疫印迹与免疫检测实验-半干转移系统转印蛋白质

1.  制备样品,并在小型或标准尺寸的单向或双向凝胶上分离蛋白质。
 
2.  准备转印膜

3.  拆卸凝胶夹层,除去积层胶。

4.  组装转印夹层:
Mylar聚酯薄膜屏蔽物
3张以转移缓冲液饱和的滤纸
已平衡的转印膜
凝胶
3张以转移缓冲液饱和的滤纸
当每一组分往上堆叠时,需排除气泡。

5.  在转移夹层的顶部放置顶电极。
 
6.  小心将高压导线和电源相连。在恒流下转移蛋白。通常只需转移1 h。
 
7.  转移后,关闭电源,拆卸转移装置,取出膜,标记好凝胶方向。进行染色和免疫检测。
 

图一、利用半干转移系统中进行免疫印迹
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