提取细胞蛋白，出现透明粘稠物的问题

慌慌 2016-08-30 21:19:12 阅读: 5901

问题：提取细胞蛋白时，出现鼻涕似的透明粘稠物是什么情况？

小杨：据说，是裂解出来的核酸，加上裂解液就超声（超声探头：超声3次，每次3秒），然后再放冰上静置就好了。

wb-慌慌：蛋白有透明粘稠物是因为没有裂解充分，或者加的裂解液少。如果是贴壁细胞，加裂解液后，可以用刮刀反复，利用机械力使细胞破碎，直到细胞液不粘稠。

蜗小懒：大家提组织蛋白研磨好之后，怎么离心？转速？时间？

wb-慌慌：刮好的细胞液转移到EP管中，可在冰上静置20-30min，然后12000rpm，4℃，20min或者15000rpm，4℃，10min。组织蛋白也可以采用这个离心条件。

邀请讨论

{{f.title}} 大小 {{f.file_size}} 下载 {{f.count_download}} 金币 {{f.count_gold}}

切换到完整评论

受邀请回答

{{f.title}} 大小 {{f.file_size}} 下载 {{f.count_download}} 金币 {{f.count_gold}}

切换到完整回复

发送回复

赞({{item.count_zan}})

踩({{item.count_cai}})

删除

回复关闭

western blot(小组)