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大个儿:亲们,有谁做过分子量是9的蛋白?
金成一:9kda?
大个儿:嗯,western blot一直做不出来。我想问问有没有特别注意的地方,半干转膜大约多久?
金成一:@大个儿 这么小的蛋白我们木有做过耶!据老师以前说过,做小蛋白都得把胶配浓,转膜具体时间可能都得缩短,具体实战经验老师木有详细说,不过按照这个原理,你可以预做几个实验,做几个百分比的胶,然后分别转15分钟30分钟和45分钟等或者你自己觉得合适的时间,最好问你研究室前辈或老师经验,都木有的话,只能这样子自己先摸索一下了
虫虫:@大个儿 小分子蛋白用tricine-sds-page来做,你是吗?
大个儿:不是,因为刚开始做western,好多东西都没听说过,也没见实验室其他人做过,求讲解。
可乐:我做过小蛋白的,把分离胶浓度为百分18或者20的就可以分离出来9kd的了~
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