质粒测序少了100多bp

智能科研狗 2016-09-01 23:23:33 阅读: 2035

可乐：大家好，我想咨询一个关于测序方面的问题。我的片段1500左右，测序时正向测序信号中断，反向测序成功～我比对了一下反向成功的序列，基本都正确。但正向少了100多bp。那么我还能用这个保种的继续下一步么？

金成一：担心的话最好在正向设计多一个primer测序，靠中间些，但是离你那没测出的一百多bp最好远一点，或者你用这个基因的qRT-PCR的primer来用于测序也可以成功的，那就不需要再麻烦设计多一个了（只要这个qPCR的primer不是在那没测出的100多bp里就好），纯粹个人意见，我比较纠结于能否把完整序列读出来

可乐：哦哦，刚进实验室，遇到了太多问题。嗯嗯，我用您的方法先试一下

金成一：你刚进研究室就能懂那么多，一说就明白已经很好了，我刚到的时候，序列是咋测的，载体是什么鬼，怎么用的，完全不知道

可乐：还得感谢像你们一样帮助我的人，感谢科研狗，感谢小木虫，感谢生物秀，感谢百度……

邀请讨论