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熊XX:有人做过transwell和划痕实验吗
金成一:划痕以前做过!测某试剂对细胞移动or生长速度的影响!
熊XX:怎么划的比较好
金成一:用1ml的那种tip,在无菌台上,手指直接捏稳tip粗大的一端,tip的尖端垂直于长满细胞的培养皿,个人觉得最好是3.5或6cm的dish,从上往下对半在培养皿上划下去,注意用力均匀就好,否则划出来的痕不平行。然后换添加有你需要测试药物的培养液进行培养。然后在显微镜下在同一条划痕上各取三个观察区域,做好标记,并分别进行照相,之后就可以放回去培养了。指定的时间后再分别对标记好的观察区进行照相,就可以看到划痕的变化了!
划痕实验,如果是测细胞移动速度,最后的数据统计,要对划痕两边的细胞进行测距,平均之后,才是一条划痕的平均距离,同一区域之后的照片,同样进行数据测距处理,两次照片得出的平均距离的差,就是细胞移动速度了。
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